1. RESUMEN DEL ROYECTO 1.1 Problema a Investigar Esta propuesta pretende determinar si existen sustancias bioactivas que puedan ser utilizadas como alternativas terapeuticas antineoplasicas en humanos y animales, asi como explorar las condiciones de cultivo de celulas de esponjas como una etapa preliminar para estudiar la factibilidad de producir metabolitos secundarios con potencial bioactivo. 1.2 Marco Teorico Colombia tiene una gran biodiversidad de fauna y flora marinas, representadas en animales, vegetales y microorganismos. Actualmente en nuestro paìs existen pocos estudios enfocados a la valoracion quimica, citotoxica, genotoxica y sobre el ciclo celular de las sustancias presentes en los recursos marinos, asi como a la evaluacion de cultivos de celulas de esponjas con miras a la produccion biotecnologica de metabolitos secundarios. Particularmente el Golfo de Uraba es una zona inexplorada ya que son pocos los reportes sobre estudios quimicos y de actividad biologica realizados a las poblaciones de organismos que alli se encuentran. 1.3 Objetivos 1.3.1 Objetivo general Estudiar desde el punto de vista quimico sustancias citotoxicas, genotoxicas y antiproliferativas potencialmente presentes en extractos de esponjas marinas colombianas y estimar la posibilidad de producirlas in vitro mediante la obtencion de cultivos celulares de especies con mayor actividad biologica, con miras a evaluar su potencial en la bioprospeccion de recursos marinos colombianos. 1.3.2 Objetivos especificos 1. 1 Evaluar el potencial efecto citotoxico, genotoxico y antiproliferativo de los extractos crudos de 12 especies de esponjas colombianas en lineas celulares leucemicas mediante los siguientes analisis: prueba de exclusion de colorante, ensayos de clonacion, ICH, test cometa, funcion de acumulacion y citometria de flujo. 2. Aislar las sustancias y/o fracciones que presenten mayor actividad biologica de cada una de las especies de esponjas estudiadas, por metodos fisicoquimicos. 3. Caracterizar cada una de las sustancias y/o fracciones de mayor actividad por metodos cromatograficos, espectrales y quimicos. 4. Evaluar las condiciones de cultivo celular in vitro de dos de las esponjas cuyos extractos muestren mayor actividad biologica. 1.4 Metodologia Se estudiaran 12 especies diferentes de esponjas colectadas en el Golfo de Uraba. Cada ejemplar se cortara en trozos pequenos y se sometera a extraccion con: n-hexano, cloroformo y metanol. Las evaluaciones de actividad biologica se efectuaran mediante, el test cometa en celulas de mamiferos, citometria de flujo, ICH y HGPRT, ademas, se utilizaran las lineas celulares CHO y dos lineas de leucemia humana. Los extractos mas activos se someteran a fraccionamiento cromatografico biodirigido y las fracciones y/o compuestos puros seran aislados y caracterizados quimicamente a traves de metodos espectrales. 1.5 Resultados Esperados Resultado/Producto esperado Indicador Beneficiario Nuevo conocimiento quimico y biologico de las sustancias extraidas de las especies del Golfo de Uraba Publicaciones nacionales y/o internacionales Comunidad cientifica Nuevo conocimiento biotecnologico para el cultivo de celulas de esponjas para la produccion de metabolitos secundarios Formacion estudiantes de Maestria y Doctorado Tesis Comunidad cientifica Consolidar las lineas de investigacion de cada grupo participante. Formacion de recurso humano U de A, UNAL Publicaciones 4 articulos en revistas internacionales Comunidad cientifica Presentacion de ponencias en eventos cientifico-academicos Certificado de participacion en los eventos En el caso de obtener sustancias con actividad biologica interesante Solicitud de patente y formacion de recurso humano Comunidad del Golfo de Uraba, UdeA, UNAL, comunidad cientifica